1. Muestras de ADN:
DO260/280 = 1,6-1,8
Concentración ≥ 10 ng/μL
Volumen ≥ 10 μL
Enviado en hielo (bolsas de hielo)
2. Muestras de ARN:
DO260/280 = 1,8-2,0
Concentración ≥ 20 ng/μL
Volumen ≥ 20 μL
Enviado en hielo (hielo seco)
3. Cebadores de ddPCR:
Concentración = 450 nM-900 nM
4. Sonda ddPCR:
Concentración = 250 nM
1. Ejecute el archivo de instalación en modo administrador
2. Establezca el inglés como idioma predeterminado
Concentración de muestra extremadamente baja.Para resultados positivos en el límite, es necesario llevar a cabo un análisis en profundidad en combinación con materiales de control de calidad negativos/positivos.
La(s) cepa(s) diana podrían haber sido mutadas, baja eficiencia de extracción de ácido nucleico.
Para el uso de reactivos de terceros, es necesario optimizar y verificar con el sistema RainSure dPCR.Algunos parámetros incluyen la concentración de cebadores y sondas, la compatibilidad enzimática con el aceite de generación de gotas RainSure y el perfil de ciclos térmicos.
Esto está relacionado en gran medida con el error experimental (manejo).Se recomienda colocar la pipeta verticalmente con la punta contra el fondo del pocillo de la muestra en el cartucho al agregar la mezcla maestra para evitar la creación de burbujas de aire en el pocillo de la muestra.Si aparecen burbujas de aire en el pozo de la muestra, se crearán burbujas grandes al generar gotas, lo que resultará en una cantidad reducida de gotas.
Además, recuerde siempre agregar aceite primero y luego agregar la mezcla maestra para garantizar una generación de gotas exitosa.Sin embargo, siempre es importante examinar los productos al recibirlos, así como controlar la temperatura de almacenamiento para descartar una calidad comprometida debido a la logística y el almacenamiento.
1. El chip se deja demasiado tiempo (> 10 minutos) después de agregar el aceite generador de gotas
2. Introducción de burbujas durante la adición de muestras
3. Precisión de pipeteo
4. No agregar aceite sino mezclar primero
