Kit de detección de PCR digital de un solo paso de Norovirus Multiplex FastPlex ™

Los norovirus pertenecen a la familia Caliciviridae. Son un grupo de virus de ARN positivos no envueltos, no envueltos, que causan principalmente gastroenteritis aguda o inflamación gastrointestinal. El norovirus se caracteriza por una mutación rápida, una fuerte resistencia ambiental y una dosis infecciosa baja. Es extremadamente adaptable al medio ambiente y puede sobrevivir en una variedad de entornos, proporcionando condiciones favorables para su propagación. El virus se transmite principalmente a través de la ruta fecal-oral, la transmisión de aerosol y el contacto. Los síntomas de la infección por norovirus generalmente aparecen dentro de las 12 a 48 horas después de la exposición e incluyen náuseas, vómitos, dolor abdominal, fiebre, dolor de cabeza y diarrea.

Uso previsto

Este kit está diseñado para la detección de ácidos nucleicos de norovirus GI y norovirus GII. Los resultados pueden usarse como una ayuda en el diagnóstico de pacientes con infección por norovirus o infección sospechosa, y también pueden usarse para detectar ácidos nucleicos de norovirus en el medio ambiente y los alimentos.

Los resultados de este kit son solo para referencia de diagnóstico y no deben usarse como el único criterio para el diagnóstico. Se recomienda analizar la condición junto con las manifestaciones clínicas del paciente y otros resultados de las pruebas de laboratorio.

Características del producto

Los métodos de detección para el norovirus incluyen microscopía electrónica, métodos inmunológicos y métodos moleculares. Los métodos moleculares incluyen RT-QPCR, RT-Lamp, Gene Chip, etc. Entre ellos, RT-QPCR   se conoce como el estándar de oro para detectar norovirus, pero tiene desventajas, como la necesidad de usar una curva estándar para la cuantificación y la reacción que se ve afectada por los inhibidores. La PCR digital ha resuelto efectivamente este problema. El proceso de detección no requiere una curva estándar y puede realizar un análisis cuantitativo absoluto de la carga del virus sin depender del valor de CT. Además, el sistema único de reacción de Nanolitro de PCR digital puede reducir el impacto de los inhibidores de la PCR y es compatible con volúmenes de carga de muestras más grandes. El ensayo multiplex también mejora la eficiencia de detección.

Las ventajas del método de PCR digital en la detección del norovirus son las siguientes:

Alta precisión: el kit FastPlex ™ puede proporcionar una cuantificación absoluta del ácido nucleico objetivo sin la necesidad de una curva estándar. Puede determinar con precisión el número de copias del norovirus, que es especialmente útil para la detección de muestras de baja abundancia.

Alta resistencia a los inhibidores: el sistema único de reacción de nanolitros de PCR digital puede reducir el impacto de los inhibidores de la PCR. Esto es importante para la detección de muestras con matrices complejas, como muestras ambientales y de alimentos, donde los inhibidores pueden estar presentes.

Alta sensibilidad : el kit FastPlex ™ puede detectar un pequeño número de moléculas objetivo en un gran fondo de moléculas no objetivo. Esto permite detectar norovirus en muestras con bajas cargas virales.

Alta reproducibilidad : los resultados de la prueba están menos afectados por las condiciones y los operadores experimentales, y tienen una buena reproducibilidad. Esto es importante para la consistencia y confiabilidad de los resultados de detección.

Detección de múltiples genotipos en una sola muestra: el kit FastPlex ™ puede detectar simultáneamente el norovirus gi y/o norovirus GII. La sonda de detección para el norovirus GI está marcado con fluorescencia hexadecimal, la sonda de detección para el norovirus GII está marcada con fluorescencia FAM.

Ø Ensayo de transcripción inversa de un   paso.

Ø   Puede detectar varios objetivos, como heces, aguas residuales, alimentos, pacientes y pacientes sospechosos.

Ø   Un solo pozo puede diferenciar simultáneamente diferentes genotipos (norovirus gi, norovirus gii, fago de control ms2 y control interno humano).

Ø   La cuantificación absoluta del virus puede ser tan baja como una sola copia.

El kit de detección de norovirus en un solo paso de Rainsure tiene un estricto control de calidad

(Canal Rox para monitorear la eficiencia de la extracción)

	Familia （Gⅱ）	MALEFICIO （Gⅰ）	Rox （MS2）	Cy5 （ Referencia interna de Humna ）
Contro positivo	-	-	-	-
Control negativo	+	+	+	+

El análisis de los resultados de las pruebas es simple.

No.	Familia （ Gⅱ）	MALEFICIO （Gⅰ）	Rox （Control de extracción）	Cy5 （Referencia interna humana）	Resultados
1	-	-	+	-	Negativo
2	+	-	+/-	+/-	GII positivo
3	-	+	+/-	+/-	GI POSITIV
4	+	+	+/-	+/-	Gi y giipositivo

El excelente rendimiento de linealidad del kit de detección de PCR digital de un solo paso de Norovirus Multiplex de FastPlex ™

Copation of DPCR y Método QPCR

	resultado DPCR		Resultado de QPCR			resultado DPCR		Resultado de QPCR
Nombre de la muestra	Hex （gi） cps/ul	Fam （GII） CPS/UL	Fenotipo	Valor CT	Nombre de la muestra	Hex （gi） cps/ul	Fam （GII）  CPS/UL	Fenotipo	Valor CT
Nov_1	0	6.14	Gⅱ	28.84	Nov_32	1.86	0	Gⅰ	21
Nov_2	0	3.48	Gⅱ	22.58	Nov_33	17397	0	Gⅰ	18.7
Nov_3	0	0.34	Gⅱ	25.19	Nov_34	861	0	Gⅰ	23.3
Nov_4	18145	0	Gⅰ	30.86	Nov_35	224	0	Gⅰ	25
Nov_5	28.7	24.6	Gⅰ/Gⅱ	24.33 ； 22.83	Nov_36	14.3	0	Gⅰ	22
Nov_6	247	0	Gⅰ	21.25	Nov_37	12.8	0	Gⅰ	24
Nov_16	0	253	Gⅱ	16.07	Nov_38	21.3	0	Gⅰ	25
Nov_18	0	0.207	Gⅱ	16.73	Nov_39	0	439	Gⅱ	22.64
Nov_20	0	2.26	Gⅱ	30.19	Nov_40	0	179	Gⅱ	23.91
Nov_21	0	4.54	Gⅱ	17.43	Nov_42	0	582	Gⅱ	22.24
Nov_22	0	6.62	Gⅱ	30.13	Nov_43	0	35.4	Gⅱ	24
Nov_23	1000000	859	Gⅰ/Gⅱ	19.55 ； 23.54	Nov_44	0	1467	Gⅱ	25
Nov_24	0	1000000	Gⅱ	19.89	Nov_45	0	1.92	Gⅱ	22.6
Nov_25	0	127	Gⅱ	22.42	Nov_46	0	34.8	Gⅱ	24.5
Nov_26	0	66.4	Gⅱ	22.99	Nov_47	0	541	Gⅱ	21.6
Nov_27	0	0.872	Gⅱ	26.37	Nov_48	0	179	Gⅱ	24
Nov_28	81.3	243	Gⅰ/Gⅱ	26.34 ； 23.82	Nov_49	0	443	Gⅱ	22
Nov_30	0.288	2.3	Gⅰ/Gⅱ	25.92 ； 24.22	Nov_50	0	8599	Gⅱ	20
Nov_31	146	0	Gⅰ	24.7